LABORATORIO No.5
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE ALGUNOS COMPONENTES DEL PROTOPLASMA CÉLULAR
INTRODUCCIÓN
Las biomoléculas son compuestos de carbono con una variedad de grupos funcionales y se encuentran jerárquicamente organizados en las células. La versatilidad de los átomos de carbono para formar enlaces covalentes sencillos y dobles principalmente, es de gran significancia biológicaporque a partir de ellos se establecen unidades monoméricas como los monosacáridos, aminoácidos y nucleótidos. La polimerización de estas unidades monoméricas primarias permite la aparición de un segundo nivel de complejidad al que pertenecen macromoléculas como los polisacáridos (almidón y glucogéno), proteínas (albúmina e histonas) y ácidos nucleicos (DNA y RNA). Las interacciones demacromoléculas a través de diferentes tipos de fuerzas intermoleculares y mecanismos complejos de empaquetamiento, permiten la conformación de las diferentes organelas (membranas plasmáticas) y estructuras supramoleculares, como los cromosomas. Finalmente la interacción conjunta de las biomoléculas en sus diferentes niveles de organización permite la conservación de la estructura y funcionamiento de las células(Ver Figura No. 5.1). En esta práctica se estudiarán los dos primeros niveles de complejidad estructural de algunas biomoléculas, para lo cuál el estudiante deberá consultar acerca de sus características y propiedades físico-químicas, de forma tal que pueda comprender los resultados de los ensayos que aquí se realicen. 32
5.1 OBJETIVOS
5.1.1 OBJETIVO GENERAL:
? Identificar en formacualitativa la presencia de algunos componentes que se encuentran en el protoplasma celular.
5.1.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
? Determinar mediante métodos cualitativos la presencia de carbohidratos, lípidos, proteínas, enzimas y ácidos nucleicos en muestras de materia viva.
? Reconocer la composición química de los reactivos que se utilizan en la identificación de los compuestos protoplasmáticos.
?Investigar las reacciones que se producen en la identificación de los compuestos protoplasmáticos.
Figura No. 5.1. Biomoléculas
5.2 MATERIALES:
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? Tubos de ensayos
? Pipetas
? Goteros
? Gradillas para tubos de ensayos
? Mechero de alcohol
? Pinzas
? Reactivo de Benedict
? Solución de glucosa al 3%
? Fruta madura
? Levadura activa
? Almidón
? Macerado de pan
? Lugol
? Solución de clara de huevo
?Solución de gelatina sin sabor
? Suero fisiológico
? Hidróxido de sodio al 10%
? Sulfato de cobre al 0.5%
? Aceite vegetal
? Grasa animal
? Sudan III o IV
? Baño de maría
? Agua destilada
? Solución sanguínea
? Suspensión de levadura activa
? Reactivo de difenilamina
? Papel filtro
? Anhídrido acético
? Cloroformo
? Ácido Sulfúrico concentrado
? Solución reactivo de almidón al 1%
5.3 PROCEDIMIENTO:5.3.1. Determinación de carbohidratos: 5.3.1.1 Monosacáridos:
a. En un tubo de ensayo se vierten 5ml del reactivo de Benedict, y se calienta hasta ebullición. No debe cambiar de color.
b. Se añade al mismo tubo de ensayo 1ml de una solución de glucosa y se calienta hasta ebullición. ¿Qué color aparece? Una turbidez verde indica de 0.1 a 0.3% de azúcar reductor, y un precipitado rojo naranja o rojoladrillo, indica que la concentración de azúcar supera el 1.5%. Ver figura No. 4.2
c. Macere un pedacito de fruta madura y adiciónela a un tubo de ensayo que contiene 5 ml de reactivo de Benedict. Caliente hasta ebullición. ¿Nota algún cambio? Analice sus resultados y saque conclusiones.
Figura No. 5.2 Prueba de Benedict.
5.3.1.2 Polisacárido:
a. Haga una suspensión acuosa de almidón y vierta en untubo de ensayo 2 ml de ella.
b. Agréguele a la anterior solución dos gotas de solución de lugol. ¿Qué cambio se experimenta? Anote los resultados.
Caliente hasta ebullición esta solución por dos minutos, ¿Se experimenta algún cambio?
Deje el tubo de ensayo en reposo hasta que se enfríe. ¿Qué sucede? Ver figura No. 4.3
c. Deposite dos gotas de lugol en una solución acuosa de un macerado de pan,…